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FUNDAMENTO

¿QUÉ ES?

Un microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una única lente pequeña y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espécimen). Este uso de una única lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos ópticos.

Historia

  • 1608 Zacharias Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes.
  • 1611 Kepler sugiere la manera de fabricar un microscopio compuesto.
  • 1665 Robert Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los pequeños poros en forma de caja a los que él llamó "células". Publica su libro Micrographia.
  • 1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observará bacterias por primera vez 9 años después.
  • 1828 W. Nicol desarrolla la microscopía con luz polarizada.
  • 1838 Schleiden y Schwann proponen la teoría de la célula y declaran que la célula nucleada es la unidad estructural y funcional en plantas y animales.
  • 1849 J. Quekett publica un tratado práctico sobre el uso del microscopio.
  • 1876 Abbé analiza los efectos de la difracción en la formación de la imagen en el microscopio y muestra cómo perfeccionar el diseño del microscopio.
  • 1881 Retzius describe gran número de tejidos animales con un detalle que no ha sido superado por ningún otro microscopista de luz. En las siguientes dos décadas él, Cajal y otros histólogos desarrollan nuevos métodos de tinción y ponen los fundamentos de la anatomía microscópica.
  • 1886 Carl Zeiss fabrica una serie de lentes, diseño de Abbé que permiten al microscopista resolver estructuras en los límites teóricos de la luz visible.
  • 1908 Köhler y Siedentopf desarrollan el microscopio de fluorescencia.
  • 1930 Lebedeff diseña y construye el primer microscopio de interferencia.
  • 1932 Zernike inventa el microscopio de contraste de fases.
  • 1937 Ernst Ruska y Max Knoll, físicos alemanes, construyen el primer microscopio electrónico.
  • 1952 Nomarski inventa y patenta el sistema de contraste de interferencia diferencial para el microscopio de luz.

Partes del microscopio óptico y sus funciones



1.- Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite el sostén estable del mismo.

2.- Platina: Plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo.

3.- Tornillo micrométrico: Tornillo de enfoque, mueve la platina o el tubo hacia arriba y hacia abajo de forma lenta, para un enfoque más preciso.

4.- Objetivo: lente situada en el revolver. Amplía la imagen, es un elemento vital que permite ver a través de los oculares.

5.- Tornillo macrométrico: tornillo de enfoque, mueve la platina o el tubo hacia arriba y hacia abajo.

6.- Revolver: Sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar uno u otro, alineándolos con el ocular.

7.-Brazo: Estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque asociados al tubo o a la platina. La unión con la base puede ser articulada o fija.

8.- Cabezal: Parte en la que se encuentran montados los oculares y que los conecta con el tubo. 

9.- Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.

10.- Tubo: Cámara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una cremallera para permitir el enfoque.

11.- Foco: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

12.- Pinza: tienen la función de mantener fija la preparación una vez esta se ha colocado sobre la platina.

13.- Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen formada en los objetivos.

Sistema de iluminación

La fuente de luz, con la ayuda de una lente (o sistema), llamada colector, se representa en el plano del diafragma iris de abertura del condensador. Este diagrama se instala en el plano focal anterior del condensador y puede variar su abertura numérica. El diagrama iris dispuesto junto al colector es el diafragma de campo. La variación del diámetro del diafragma de campo permite obtener su imagen igual al campo visual lineal del microscopio. La abertura numérica del condensador supera, generalmente la de la abertura del objetivo microscópico. es la iluminación que permite ver mejor lo que queremos observar como las células o las membranas celulares entre otros

Objetivos de inmersión

El medio óptico líquido que rellena el espacio entre el objeto y el objetivo se le denomina líquido de inmersión. El índice de refracción de este es próximo al del vidrio (se utiliza agua, glicerina, aceites de cedro y de enebro, monobromonaftalina, entre otros).

Aplicaciones del microscopio óptico

Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los campos de la ciencia en donde la estructura y la organización microscópica es importante, incorporándose con éxito a investigaciones dentro del área de la química (en el estudio de cristales), la física (en la investigación de las propiedades físicas de los materiales), la geología (en el análisis de la composición mineralógica y textural de las rocas) y, por supuesto, en el campo de la biología (en el estudio de estructuras microscópicas de la materia viva), por citar algunas disciplinas de la ciencia.

Hasta ahora se da uso en el laboratorio de histología y anatomía patológica, donde la microscopía permite determinadas aplicaciones diagnósticas, entre ellas el diagnóstico de certeza del cáncer, numerosas estructuras cristalinas, pigmentos, lípidos, proteínas, depósitos óseos, depósitos de amiloide, etcétera.

Características de la visión en el microscopio

1. Grado de Aumento: Es la magnificación total que sufre la imagen del objeto debido al efecto de los lentes oculares y objetivos. Se obtiene multiplicando el número de veces que aumenta el lente ocular por el número de veces que aumenta el lente objetivo. Si el objetivo aumenta la imagen de un objeto 40 veces, ésta al pasar por la lente ocular será nuevamente aumentada.

Si el ocular aumenta 10 veces, la magnificación total en este caso será:

10X x 40X = 400X.

Este resultado permite saber cuantas veces más grande estamos viendo la imagen de un objeto. 


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